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一、菌的概述
1.定义:微生物制剂(Microbial ecological agent) 是从自然界或动物体内分离得到的有益菌,经培养、发酵、加工等工艺制成的包含菌体及其代谢产物的活菌制剂。
2.分类:按照组成成分可分为单一型和复合型;按照作用可分为水质改良剂和饲料添加剂;按照是否需氧可分为耗氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌。
二、菌的作用机理及应用
(一)作用机理
1.生态平衡理论:在水体、动植物体表及体内,池塘底泥中生活着大量的微生物构成的微生态系统,一般情况下处于动态平衡,对宿主和微生物群落是有利的。一旦由于某些条件改变而使这个动态平衡遭到破坏,压力、温度、抗生素、水体中残饵积累、化学药物使用。就会失去优势种群,微生物群落就会解体。因此,平时要注意补充有益菌维持平衡状态。
2.生物屏障理论:生物屏障指定植于黏膜或皮肤上皮细胞、水体、鱼鳃、养殖对象体表等部位的益生菌所形成的生物膜结构,从而防止过路菌以及外来致病菌的定植、占位、生长和繁殖。有益菌与宿主黏膜上皮紧密结合形成致密性菌膜形成生物屏障。在代谢过程中产生挥发性脂肪酸和乳酸,降低生境内的pH等,产生过氧化氢抑制病原菌有的细菌产生抗生素和细菌素,杀死病原菌。
3.生物夺氧理论:使用一些需氧微生态制剂进入动物肠道在生长繁殖过程中可消耗过量的氧气,使局部环境中氧分子浓度降低,氧化还原电位下降,造成厌氧环境,有利于厌氧菌生长繁殖。正常情况下,肠道优势种群为厌氧菌,约占99%,而需氧菌和兼性厌氧菌只占1%。
4.促进三流循环:指微生态系统中的能量流、物质流、基因流的运转体系。微生物与宿主细胞之间通过降解、吸收、合成代谢进行物质交换。细胞裂解成分过胞外酶可被微生物利用,微生物产生的酶、维生素等以及降解的细胞成分可以被宿主细胞利用,从而进行循环。改善机体代谢,补充营养成分,促生长;参与生物降解,消除污染物,净化环境。
(二)应用
1.水质改良剂:光合细菌、芽孢杆菌、EM菌等能够有效分解有机物,将池塘中有机物分解转化成为单胞藻类吸收利用的物质,减少粪便、残饵等残留,消除水体发黑、发白等现象,防止水体恶化。
2.饲料添加剂:作为饵料添加剂一方面随食物进入养殖动物肠道后,可以促进消化酶的分泌,提高饲料转化率,从而起到促进生长的作用;另一方面可刺激机体产生各种物质,提高机体免疫能力。
三、常用菌介绍
(一)光合细菌
1.概述
在厌氧条件下进行不产氧光合作用的细菌,具有原始光能合成体系。光合细菌是自然界存在比较古老的细菌类群,光合细菌适宜水温为15-40℃,最适水温为28-36℃。广泛分布于沼泽、池塘、湖泊、河流、水沟、海洋以及土壤中,忍耐高温、高盐及低温、低盐的能力特别强。
2.应用
水质改良剂,净化水质:光合细菌以小分子有机物、二氧化碳等作为碳源,氨、铵盐、硝酸盐或亚硝酸盐等作为氮源,使得光和细菌可以在水质净化中发挥重要作用,有效的去除水体中H2S,降低水体中氮和COD。
苗种的开口饵料:光合细菌菌体微小,仅为小球藻的1/20,可被浮游动物捕食,促进水体中轮虫等浮游动物的生长,而浮游动物又作为各种鱼类的开口饵料 ,被鱼苗摄食,从而能大幅度提高鱼苗的成活率。
作为饵料添加剂:光合细菌的营养价值十分丰富,其中粗蛋白质含量高达57.9%,粗脂肪为7.9%,可溶性糖类为20.8%,并含有16种必需氨基酸。除此以外还含有生物素(如维生素B12和辅酶Q10),因此可作为饲料添加剂,直接拌入饲料中投喂。
作为免疫增强剂,鱼病防治:光合细菌含有抗病毒因子及多种免疫促进因子,可活化机体的免疫系统;可释放具有抗病力的酵素,对水体中可引起鱼、虾、贝类的细菌性疾病的病原体具有一定的抑制作用。
(二)芽孢杆菌
1.概述
芽孢杆菌属是一类好氧或兼性厌氧,在一定条件下能产生抗逆性内生孢子的化能异养菌,多数为腐生菌。主要分布于土壤、植物体表面及水体中,生理特性丰富多样,是土壤和植物微生态优势种群之一。最广泛应用的是枯草芽孢杆菌,芽孢杆菌属的一种,革兰氏阳性菌,严格好氧,是我国农业部正式批准使用的益生菌。具有较强抗逆能力,存活期较长的细菌。
2.特性
耐高温、耐挤压,可以满足饲料加工制粒过程中的要求。
耐受干燥环境,便于储存、运输,且以孢子形式存在不会消耗饲料的营养成分,保证饲料品质。
孢子体耐受酸碱,可避免消化液对其产生的破坏,从而可以顺利进入宿主肠道。
能分泌产生多种酶类及营养代谢产物。
3.应用
(a)减少病害发生,促进动物生长
①一方面形成肠道厌氧环境,有利于乳酸菌这类益生菌的繁殖,抵抗外来病原菌的入侵和定植。另一方面芽孢杆菌通过产生细菌素和有机酸等杀死或抑制病原菌。抑制致病菌的增加,减少疾病发生的机会。②枯草芽孢杆菌细胞的主要成分是葡聚糖,它作为免疫刺激剂起作用,提高养殖动物的免疫力,增强对疾病的抵抗能力。
(b)产生多种酶类,提高动物消化酶活性
芽孢杆菌具有多种消化酶活性,如:蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及降解饲料中复杂碳水化合物的酶等,可降解饲料中的某些抗营养因子,使饲料的转化率提高从而促进生物生长。此外,芽孢杆菌可产生维生素、有机酸、氨基酸等多种营养物质,为养殖生物提供必需的营养成分加快其生长。
(c)改善养殖水体环境
芽孢杆菌分泌的胞外酶系可快速降解养殖水环境中的有机物,使之先分解为小分子(多肽、高级脂肪酸等),后分解为更小分子有机物(氨基酸、低级脂肪酸、单糖、环烃等),最终分解为二氧化碳、硝酸盐、硫酸盐等,有效降低了水中的COD、BOD,使水体中的氨氮与亚硝酸氮、硫化物浓度降低,从而有效地改善水质。
4、注意事项
池塘溶解氧。要在晴天使用。
使用前活化。
(三)硝化细菌
1.概述
硝化细菌是一类能够降解氮和亚硝酸盐的自养型细菌,原核生物。亚硝化菌属和硝化杆菌属。大多数普遍存在于中性或偏碱性、通性良好、含氨态氮的土壤中,硝化球菌属和硝化刺菌属的种仅分布在海水中。
2.特性
(a)专一性的化能自养菌
能利用亚硝态氮获得合成反应所需的化学能,在体内制造糖类,对底物的要求具有很强的专一性。
(b)形态多样性
细胞形态多种多样,如球形,杆状,螺旋状等。有的极生鞭毛,可以游动;有的向细胞外分泌黏性物质,可以将几个细胞粘在一起形成团块,叫做菌胶团。
(c)繁殖速度慢
硝化细菌有自身合成糖类,这一过程需要时间,平均一代时间在10h以上。一般异养性微生物可几十分钟内增殖一倍数量,而硝化细菌则要 1—2d才能增殖一倍的数量;另外,硝化细菌不喜欢有机物,水体中过多的有机物反而会抑制硝化细菌的生长。
(d)细胞结构复杂
大多数具有复杂的薄膜状、囊泡状、管状膜内褶结构。
(e)专性好气菌
3.应用
降低水产养殖水体中所产生的氨氮和亚硝酸盐的含量,改善水体,降低氨氮及亚硝酸盐对水产养殖动物的危害,确保养殖生产安全。作用过程分为以下两个阶段:
(四)EM菌
EM菌为有效微生物群的英文缩写,它是由光合细菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌、丝状菌等五大类菌群中80余种有益菌种复合培养而成。
EM菌渗入水体后,能抑制病原微生物和有害物质,促进浮游生物的大量繁殖和提高水中溶氧量,保持养殖水体的生态平衡,净化养殖池塘中的排泄物和残饵,改善水质和底质,从而减少疾病。
(五)酵母菌
1.概述
酵母菌是一类单细胞的真核微生物的通俗名称,属于真菌,是具有核膜与核仁分化的较高等的微生物。不能运动,细胞一般呈圆形、椭圆形,个别种类可形成假菌丝。温度18℃~28℃,pH值4~6,一般为兼性厌氧。在土壤、海洋、牛奶、动植物体内、动物排泄物及其栖息地都能发现。
2.特性
酵母细胞营养价值丰富,其中有机物含量占90-94%,还富含多种维生素、矿物质和各种消化酶,含有多种色素和未知的活性物质。
3.应用
(a)饲料添加
酵母细胞含有丰富的营养成分,弥补了常规饵料营养缺陷,对各种水产动物幼体起到了十分重要的营养强化作用和促生长作用。
(b)水质改良剂
海洋酵母在育苗水体中能良好地生长,迅速利用水体中的有机物、氨态氮、硫化氢等有害成分,净化水质的效果显著而持久。
(c)预防疾病
海洋酵母在育苗水体中占有绝对的种群数量优势。可有效地抑制其它有害微生物的生长。起到了生物防治的作用。
4.饲料添加相关研究
(a)饲料酵母
饲料酵母以酿酒酵母细胞为主要组分, 富含动物生长所需的多种营养物质。大量研究证明,在动物饲料中适当添加饲料酵母可以改善饲料适口性,增加采食量,提高饲料转化效率,是目前较为理想的廉价蛋白饲料之一。
(b)酵母水解物
酵母水解物具有消化利用率高、适口性好、资源丰富等优点。其富含天然核苷酸、小肽、多种游离氨基酸和 B 族维生素等,能补充动物快速生长时期内源核苷酸合成的不足, 修复肠道,提高免疫力,改善肝功能,促进生长发育,在水产养殖中表现出良好的应用前景。
(c)酵母细胞壁多
主要的功能成分是 β-葡聚糖和甘露聚糖。它能刺激水产动物免疫细胞,促进免疫器官的发育,强化其免疫系统功能;提高水产动物抗应激能力,减少应激反应;并减少肠道病原菌数量,促进有益菌繁殖,调节肠道功能;预防及辅助治疗疾病,减少抗生素用量。
注意:酵母细胞壁在饲料中使用时应该注意,不同种类的添加量有一定的差异,按推荐量视不同养殖品种、规格、环境的差异可酌情增减。
(六)乳酸菌
1.概述
乳酸菌是一类能够利用可发酵性碳水化合物(主要是糖类)产生大量乳酸的无芽孢、革兰氏阳性细菌的总称。分布十分广泛,在自然界各种地方都能发现乳酸菌的存在 。厌氧或兼性厌氧生长,最适温度为37℃。
2.应用
(a)抑制病原菌,预防疾病
①产生的乳酸等有机酸能显著降低环境pH值和Eh(氧化还原电位)值,使肠内处于酸性环境,对于致病菌如痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、弯曲杆菌、葡萄球菌等有拮抗作用。②产生的过氧化氢能够激活牛乳中的“过氧化氢酶-硫氰酸”系统,抑制和杀灭革兰氏阴性菌、过氧化氢酶阳性细菌如假单胞菌属、大肠杆菌类和沙门氏菌属等。③产生类似细菌素的细小蛋白质或肽类(抗菌肽),如各种乳酸杆菌素和双歧菌素,对葡萄球菌、梭状芽孢杆阔以及沙门氏菌和志贺氏菌有拮抗作用。总之, 因为乳酸菌抑制了腐败菌的生长繁殖,减少了有毒代谢产物的吸收,调节肠道菌群平衡,减少肝胆的代谢负担,可以改善肝功能,预防细菌性疾病和肝胆疾病的发生。
(b)促进消化,提高免疫力
①乳酸菌在体内能够正常发挥代谢活性,分解食物中的蛋白质、糖类、合成维生素以及对脂肪。在乳酸菌蛋白酶的作用下,食物中的大分子蛋白质部分降解为宿主可以直接利用的小分子肽和必需氨基酸,显著提高了食物的消化率和生物价,促进胃肠的吸收。②经乳酸菌发酵后,食物中的乳糖可被乳酸菌转化成葡萄糖和半乳糖,进而转变为乳酸等小分子化合物,易于消化。③部分脂肪可被乳酸菌发酵降解,易于消化并增加其中游离脂肪酸、挥发性脂肪酸的含量。④乳酸菌在代谢过程中消耗部分维生素,同时合成叶酸等B族维生素,提高矿物元素的生物活性,进而达到为宿主提供必需营养物质、增强营养代谢、促进其生长的作用。
(c)净化养殖水质
与芽孢杆菌、光合细菌、反硝化细菌等有益菌混合使用,作为养殖水体的水质调节剂。可有效分解养殖水体中的残饵、粪便等有机质,降低氨氮、亚硝酸盐和硫化氢等有害物质含量,净化水质。
七常用菌种总结
1.光合细菌:外泼,不好氧,分解小分子有机质,降解硫化氢及亚盐。
2.芽孢杆菌: 外泼,分解大分子有机物净化水质,去除氨氮亚盐。内服,可产生多种消 化酶和细菌素类代谢物对于降低饵料系数和预防肠道疾病效果较好。
3.酵母菌:内服,提高免疫力,促进营养物质吸收。外泼,降解水体毒性维持水体稳定(有机酸)。
4.乳酸菌:内服,诱食,防病健肠道。
四、何时用菌
1,早:尽早使用,尽早建立稳定微生态内环境和外环境。
2.勤:用的要勤,要坚持定期使用。
3.稳:注重维持水体环境,不能总是在环境明显恶化以后才采取应急措施。池塘表面有油膜、藻沫子等时急需用菌;养殖中后期、温度上升后、投喂量加大时用菌要增加。
室外池塘:微生物指数分裂2-3天可达到高峰,6-7天进入稳定期达到高峰。
结论:7-10天定期使用微生物制剂,稳定水质。